接下来胶体金厂家来为大家介绍一下免疫胶体金技术的基本知识:
一、免疫胶体金技术基本知识
1、胶体金这个概念
氯金酸(HAuCl4)在氧化剂影响下,可汇聚成一定大小的小金颗粒,产生带负电荷的疏水胶水溶液。因为静电引力成为相对稳定的胶体状态,故名胶体金。
2、免疫金标记技术
胶体金颗粒物表面负电与蛋白质的正电官能团因静电力而产生坚固融合。胶体金对蛋白质有极强的吸附功能,蛋白质等高分子材料被吸附到胶体金颗粒物表面,无化学键产生,标识后大分子蛋白质活力不发生变化。
3、胶体金的示踪剂原理
金颗粒具有较高的电荷密度的特点。金标蛋白质在相应的配位处大量聚集时,在显微镜下由此可见深褐色颗粒或可观测红色或淡粉色色斑。
免疫黄金白银上色:运用金颗粒可催化反应纳米银转变成金属银这一原理,根据银颗粒堆积,在电镜下由此可见抗原抗体反应的呈阳性位置展现银的深褐色。
二、胶体金制取需要注意的事项
(1)玻璃器皿清洁:玻璃器皿应肯定清理,用前酸洗钝化、铝硅酸盐。
(2)实验试剂、水体:试验自来水一般用双蒸水。缓冲溶液有足够的缓冲容量,浓度值不可太高以防金胶体溶液自凝。
三、免疫胶体金的制取
1、制取胶体金标识蛋白质应注意的问题
(1)蛋白质的预备处理。蛋白质先要对低电离度水分析,清除酸盐成份。用微孔滤膜或超速离心去掉蛋白质溶液中的细微颗粒。
(2)低含盐量的缓冲溶液。过多盐可让金颗粒产生凝结。
(3)PH接近蛋白质等电点或略偏碱性。蛋白质所在融解情况比较适合偶联反应,蛋白质分子结构在金颗粒表面的吸附容量较大。
(4)蛋白质最可用量挑选:可以使胶体金相对稳定的适宜蛋白量加上10%即是最好标识蛋白量。
(5)胶体金与蛋白质偶联反应后,添加增稠剂,以避免发生凝结。一般选用PEG和牛血清白蛋白作增稠剂。
以上就是胶体金厂家为大家介绍的文章,希望能够帮助到大家!
