2、连接机理研究人员广泛接受的理论为，三种特殊的氨基酸残基在金颗粒物与蛋白质的连接功效中发挥了重要作用。而磷酸氢钙、谷氨酸和胱胺酸这三种氨基酸与胶体金连接的作用机制不尽相同。磷酸氢钙带具有较强的正电，因此自然吸咐带负电的金颗粒物；谷氨酸主要是通过亲水性影响与胶体金相联接；胱胺酸根据 SH-与金表层以同用电子的方式产生配位键。抗体根据这几点作用力与胶体金颗粒物坚固、稳定、不易分开的结合在一起。在一定程度上，胶体金厂家标记成功和失败在于以上三种氨基酸残基被标记蛋白里的结合位点。在一定前提下，碳水化合物连接于蛋白质的活性部位，进而影响蛋白质的反应活性。空间位阻限制，当这几点氨基酸残基定位为抗体的抗原相接处或抗原的特殊抗体融合决定簇位置时，有可能出现这一类型的影响。一旦被标记的蛋白质分子未作特殊的处理方法就基本不可能摆脱这类影响。想要在免疫测定中灵敏，这三种与标记有关氨基酸恰当融合是很重要的。就标记抗体而言，这三种碳水化合物应定位为 Fc 区，但对于标记抗原体，胶体金厂家应避开抗原体反应决定簇部位。
3、标记方式的调节为了能开发、提升单一标记的胶体金结合物，科研人员一般制取小批量生产的高达60生产批次不同胶体金结合物。每批号胶体金结合物在某一重要制取流程上面与其他不一样，各批都待测试进而明确哪一种标记技术对测试分析很有可能取得反应结论。这种调节应当包含全部能改善胶体金结合物的敏感度、交叉反应及其潜在可靠性的技术参数。典型的检测应包括但是不应仅限抗体工作中缓冲溶液、添加剂的种类、含盐量、表层活性剂成分、胶体金颗粒规格、封闭剂的种类、总蛋白浓度、结合物工作中缓冲溶液及其结合物的浓度值。
