双抗体夹心法：首先把已知非特异抗体（单抗或多抗）以一定的量抱被于膜上做为检测带，能与金标物相结合的二抗做为质量控制带。与抱被抗体般配对的另一单抗金标结合物则粘附于金标垫着然后进行干躁。干燥金标垫一端与膜相连，一端与试品垫相接。膜的另一侧黏贴吸水垫。检测时，于试品垫添加一定量的液态样版，依靠毛细管作用，样版沿试品垫到吸水垫方向挪动。它首要通过干躁金标垫，使金标结合物复溶，如样本中尚需测抗原，则产生抗原抗体反应，产生物质A（金颗粒物－抗体－抗原）；样版继续移动抵达检测带部位，则与抱被抗体再次出现抗原抗体反应，产生物质B（金颗粒物－抗体－抗原－抱被抗体），并且于检测带部位集聚，从而达到明显的水平，如样版中无待检抗原，则无法产生很明显的鲜红色杂带。分散的金标结合物或物质A翻过检测带抵达质量控制带，与二抗产生反应，产生物质C（金颗粒物－抗体－二抗），集聚从而产生很明显的鲜红色杂带。不管样版中是不是带有待检化学物质，质量控制带都是会展现鲜红色杂带。
双抗体夹心法（double antibody sandwich format）主要运用于检测较大的生物分子及颗粒性抗原（细菌和病毒、病毒感染、蛋白、LPS等）。胶体金厂家介绍大一点的抗原分子结构有多个抗原结构域，对不同状况可以采取单抗跟多抗匹配或单抗和单抗配对检测。单抗匹配时解决两株单抗开展结构域剖析，结构域距离很远的单抗，其匹配检测效果就越好。有人说在一些前提下，可以用同一株单抗制取双抗体夹心实验试剂，基础是抗原有着多个同样的结构域用以融合抗体。
双抗原夹心法：双抗原夹心法的特性取决于抱被和标识均是抗原，检测时，试品里的待检抗体首先与标识抗原融合，再和抱被抗原融合。其质量控制线应抱被标识抗原的多抗，但实际检测中，质量控制线效果通常不太好。
双抗原夹心法检测抗体的优势取决于它检测是指总抗体，即样版里的IgG、IgM、IgA等非特异抗体都可做为搭桥术抗体产生阳性结果，对其人兽共患病的检测更有价值，胶体金厂家既可以用其检测人血清抗体，也可以检测动物血清抗体，以此来实现用同一种检测实验试剂检测不一样属种的抗体。此外，双抗原夹心法的非特异和敏感性易于控制，而且可以达到非常高的水平。
